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                    吸附柱色譜法分離精制中藥對照品

                    發布日期:2011-12-25 

                    吸附柱色譜法
                       
                    柱層析法是分離精制化合物的常用方法.主要有吸附柱層析、分配柱層析、離子交換層析、凝膠過濾層析等。
                        由于中藥有效成分類型不同.性質各異,所以選擇層析條件是不同的。
                        (一)吸附柱色譜法
                        吸附柱層析法是將粗提物樣品加在裝有吸附劑(氧化鋁、硅膠、聚酰胺等)的長玻璃柱中,再加適當的溶劑沖洗,由于吸附劑對各組分吸附能力不同而在柱中向下移動速度不同,吸附能力最弱的組分隨溶劑首先流出,通過分段定盤收集洗脫液而使各組分得到分離的方法。

                    吸附柱色譜詳細介紹:

                    色譜管為內徑均勻、下端縮口的硬質玻璃管,下端用棉花或玻璃纖維塞住,管內裝入吸附劑。吸附劑的顆粒應盡可能保持大小均勻,以保證良好的分離效果。除另有規定外,通常多采用直徑為0.07~0.15mm的顆粒。色譜柱的大小,吸附劑的品種和用量,以及洗脫時的流速,均按各品種項下的規定。
                    (1) 吸附劑的填裝 ①干法 將吸附劑一次加入色譜柱,振動管壁使其均勻下沉,然后沿管壁緩緩加入洗脫劑;或在色譜柱下端出口處連接活塞,加入適量的洗脫劑,旋開活塞使洗脫劑緩緩滴出,然后自管頂緩緩加入吸附劑,使其均勻地潤濕下沉,在管內形成松緊適度的吸附層。操作過程中應保持有充分的洗脫劑留在吸附層的上面。
                    ②濕法 將吸附劑與洗脫劑混合,攪拌除去空氣泡,徐徐傾入色譜柱中,然后加入洗脫劑將附著管壁的吸附劑洗下,使色譜柱面平整。俟填裝吸附劑所用洗脫劑從色譜柱自然流下,液面和柱表面相平時,即加供試品溶液。
                    (2) 供試品的加入 除另有規定外,將供試品溶于開始洗脫時使用的洗脫劑中,再沿色譜管壁緩緩加入,注意勿使吸附劑翻起?;驅⒐┰嚻啡苡谶m當的溶劑中,與少量吸附劑混勻,再使溶劑揮發去盡使呈松散狀,加在已制備好的色譜柱上面。如供試品在常用溶劑中不溶,可將供試品與適量的吸附劑在乳缽中研磨混勻后加入。
                    (3)洗脫 除另有規定外,通常按洗脫劑洗脫能力大小遞增變換洗脫劑的品種和比例,分別分部收集流出液,至流出液中所含成分顯著減少或不再含有時,再改變洗脫劑的品種和比例。操作過程中應保持有充分的洗脫劑留在吸附層的上面。


                    最后更新:2019-04-20
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