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                    文章列表 資料庫下載分類 上海純優生物科技有限公司
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                    總蛋白提取試劑盒說明書

                    發布日期:2011-10-25 

                     

                    總蛋白提取試劑盒

                      產品組成:

                    產品組成 310003 310004
                    規格 50 assays 100 assays
                    總蛋白提取液 25ml 50ml
                    蛋白酶抑制劑混合物 100ul 200ul
                    儲存條件:


                      蛋白酶抑制劑-20℃保存; 蛋白提取液2-8℃保存。

                      有效期:

                      一年。

                      注意事項:

                      ● 本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。

                      ● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。

                      ● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。

                      ● 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。

                      ● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

                      產品簡介:

                      貝博總蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織,如腦、脊髓、神經結或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等哺乳動物組織中提取總蛋白。提取過程簡單方便,可在1小時內完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒含有的獨特配方能夠溶解細胞膜包括細胞質膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

                      試劑盒以外自備試劑和儀器

                      ● 移液器、吸頭 ● 離心機及離心管

                      ● 渦旋振蕩器 ● 冰箱,冰盒

                      使用方法:

                      使用注意事項:

                      5. Western實驗內參可以選用beta-actin、GAPDH、Tubulin。

                      6. 更多蛋白提取常見問題分析等資料可以聯系貝博公司索取。

                      細胞總蛋白提?。?/p>

                      1. 提取液制備:每500ul冷的總蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。

                      2. 取5-10×10個細胞,在4℃,1000rpm條件下離心5-10分鐘,小心吸取培養基,盡可能吸干,收集細胞。

                      3. 用冷PBS洗滌細胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。

                      4. 每5×10個細胞中加入500ul冷的總蛋白提取液,混勻后,在4℃條件下振蕩15-20分鐘。

                      5. 在4℃,14000rpm條件下離心15分鐘。

                      6. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即可得到總蛋白。

                      7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

                      注:

                     ?、?細胞數量根據實驗情況調整,每次的裂解液用量并不是一定的,請根據實際情況調整。

                     ?、?建議用BCA法進行蛋白定量。

                     ?、?蛋白樣品-80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被細菌污染。

                      組織總蛋白提?。?/p>

                      1. 提取液制備:每500ul冷的總蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。

                      2. 取100mg組織樣本剪碎,加入總蛋白提取液,用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。

                      3. 將組織勻漿吸入一預冷的干凈離心管中,在4℃,10000rpm條件下離心5分鐘。

                      4. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即可得到總蛋白。

                      5. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

                      注:

                     ?、?用液氮研磨的方法更佳,具體方法可以聯系我們。


                    最后更新:2011-10-25
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